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種子活力鑒定
種子活力是衡量種子質(zhì)量的重要指標(biāo)，種子活力強(qiáng)，才能發(fā)好芽，長(zhǎng)出作物，那么種子活力測(cè)定方法有哪些？種子活力測(cè)定方法一般有以下幾種：氯化三苯基四氮唑法（TTC法）、溴麝香草酚藍(lán)法（BTB法）、靛紅染色法、碘化鉀反應(yīng)法、剝胚法、紙上熒光法、抗冷法、低溫法、電導(dǎo)法、加速衰老法。本文就給大家詳細(xì)介紹以上幾種種子活力測(cè)定方法。
外觀目測(cè)法。
用肉眼觀察玉米種胚形狀和色澤。凡種胚凸出或皺縮、顯黑暗無(wú)光澤的，則種子新鮮，生活力強(qiáng)，可作生產(chǎn)用種。
浸種催芽法。先將100粒種子用水浸約兩小時(shí)吸脹，放于濕潤(rùn)草紙上，蓋以濕潤(rùn)草紙，置于氧氣充足，室溫10～20℃環(huán)境中，讓種子充分發(fā)芽;再以發(fā)芽的種子粒數(shù)除以100，乘以100%，求得發(fā)芽率。這種測(cè)定方法雖然準(zhǔn)確，但需要8天時(shí)間。
紅墨水染色法。
以一份市售紅墨水加19份自來(lái)水配成染色劑;隨機(jī)抽取100粒玉米種子，用水浸泡兩小時(shí)，讓其吸脹;用鑷子把吸脹的種胚、乳胚一一剝出;將處理后種子均勻置于培養(yǎng)器內(nèi)，注入染色劑，以淹沒(méi)種子為度，染色15～20分鐘后，傾出染色劑，用自來(lái)水反復(fù)沖洗種子。死種胚、胚乳呈現(xiàn)深紅色，活種胚不被染色或略帶淺紅色，據(jù)此判斷活種子數(shù)，以此除以100，乘以100%，則為發(fā)芽率。
種子活力即種子的健壯度，是種子發(fā)芽和出苗率、幼苗生長(zhǎng)的潛勢(shì)、植株抗逆能力和生產(chǎn)潛力的總和，是種子特性的綜合表現(xiàn).是評(píng)價(jià)種子優(yōu)劣的一個(gè)主要指標(biāo)，生產(chǎn)實(shí)踐表明，實(shí)驗(yàn)室的發(fā)芽率與田間的出苗率之間往往存在很大差距。長(zhǎng)期以來(lái)都用發(fā)芽試驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)種子的質(zhì)量是不完全正確的，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中常常因種子活力的降低而造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，對(duì)種子活力的鑒別具有重要意義
將砧木種子浸入水中10至24小時(shí)，使種皮軟化，然后細(xì)心剝?nèi)シN皮(桃、杏、李、核桃等有堅(jiān)硬木質(zhì)外殼的種子，只需輕輕砸碎外殼，不需用水浸泡)，放入染色劑(百分之5紅墨水，或百分之0.1靛藍(lán)胭脂紅，或百分之0.1曙紅溶液)中，染色1至2小時(shí)，再將種子取出，用清水沖洗干凈。觀察染色后的種子，凡胚和子葉完全染色者，為無(wú)生活力的種子;胚或子葉部分染色者，為生活力弱的種子;胚和子葉沒(méi)有染色者，為有生活力的種子。
氯化三苯基四氮唑法( TTC)
1．將種子用溫水（約30℃）浸泡2--6小時(shí)，使種子充分吸脹。
2．隨機(jī)取種子100粒，紅花、蓖麻等具有外殼的需要去掉外殼，豆類種子要去皮。然后沿種胚中央準(zhǔn)確切開(kāi)，取一半備用。
3．將準(zhǔn)備好的種子浸于2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶液中，于恒溫箱( 30～35℃)中保溫30分鐘。
4．染色結(jié)束后要立即進(jìn)行鑒定，因放久會(huì)褪色。倒出TTC溶液，再用清水將種子沖洗1--2次，觀察種胚被染色的情況，凡種胚全部或部分被染成紅色的即為具有生命力的種子，種胚不被染色的為死種子。如果種胚中非關(guān)鍵性部位（如子葉的一部分）被染色，而胚根或胚芽的尖端不染色，都屬于不能正常發(fā)芽的種子。
溴麝香草酚藍(lán)法（BTB法）
1．浸種：同上述 TTC 法。
2．BTB 瓊脂凝膠的制備：取 0.1% BTB 溶液 100 mL 置于燒杯中，將 1 g 瓊脂剪碎后加入，用小火加熱并不斷攪拌。待瓊脂完全溶解后，趁熱倒在 4 個(gè)干潔的培養(yǎng)皿中，使成一均勻的薄層，冷卻后備用。
3．顯色：取吸脹的種子 200 粒，整齊地埋于準(zhǔn)備好的瓊脂凝膠培養(yǎng)皿中，種子胚朝下平放，間隔距離至少 l cm 。然后將培養(yǎng)皿置于 30 ～ 35 ℃下培養(yǎng) 1 ～ 2 小時(shí)，在藍(lán)色背景下觀察，如種胚附近呈現(xiàn)較深黃色暈圈是活種子，否則是死種子。
4．計(jì)算活種子百分率。
用沸水殺死的種子作同樣處理，進(jìn)行對(duì)比觀察。
靛紅染色法
步驟同TTC染色法。
注意事項(xiàng)
1．染料的濃度要適當(dāng)，染色時(shí)間不能太長(zhǎng)（如用紅墨水染色，只需要5～10分鐘即可），否則不容易區(qū)別染色與否。
2．靛紅染色法測(cè)定種子生活力，適用于豆類、麻類、瓜類、十字花科、果樹(shù)、喬灌木種子的生活力測(cè)定。
碘化鉀反應(yīng)法
1．將種子在水中浸18小時(shí)。
2．取出種子放在墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，將培養(yǎng)皿置30℃恒溫箱中，不同植物種子放置時(shí)間不同，如松種子放48小時(shí)，落葉松放72小時(shí)。
3．用刀片把胚部切下，然后浸入碘碘化鉀溶液中20--30分鐘后，取出胚用水沖洗12分鐘，然后在墊有白紙的玻璃板上進(jìn)行觀察。
4．鑒別種子生活力的標(biāo)準(zhǔn)是：有生活力的種子的胚部全部染成不同程度的黑色或灰色，或者胚根部呈褐色，子葉為黃色。無(wú)生活力種子的胚部全部染成黃色，或子葉呈灰色或黑色，胚根呈黃色，或胚根末端呈黑色或灰色，而其他部分呈黃色。
5．此法適于松屬、云杉屬和落葉松屬的種子生活力測(cè)定。
剝胚法
將種子在清水中浸泡24小時(shí)，使種皮軟化，切開(kāi)種皮，有胚乳的種子，還須將胚乳切開(kāi)，用解剖刀和解剖針小心地取出胚。放在鋪有濕潤(rùn)濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿50粒，重復(fù)一次，放在20--25℃的溫箱中，經(jīng)2～10天后即可觀察胚的生長(zhǎng)情況。有生活力的胚在這段時(shí)間仍然堅(jiān)實(shí)而呈白色，開(kāi)始生長(zhǎng)或轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色；而死胚則變色腐爛。離體胚測(cè)定和TTC法測(cè)定一樣比普通測(cè)定要快，但取胚時(shí)胚較易受傷。該法適于測(cè)定長(zhǎng)度大于5mm種子的生活力。
熒光法
1．直接觀察法這種方法適用于禾谷類、松柏類及某些薔薇科果樹(shù)的種子生命力的鑒定，但種間的差異較大。用刀片沿種子的中心線將種子切為兩半，使其切面向上放在無(wú)熒光的白紙上，置于紫外光燈下照射并進(jìn)行觀察、記載。有生活力的種子在紫外光的照射下將產(chǎn)生明亮的藍(lán)色、藍(lán)紫色或藍(lán)綠色的熒光；喪失生命力的死種子在紫外光照射下多呈黃色、褐色以至暗淡無(wú)光，并帶有多種斑點(diǎn)。
隨機(jī)選取20粒待測(cè)種子，按上述方法進(jìn)行觀察并記載有生活力及喪失生活力的種子的數(shù)目，然后計(jì)算有生活力種子所占百分?jǐn)?shù)。與此同時(shí)也作一平行的常規(guī)發(fā)芽試驗(yàn)，計(jì)算其發(fā)芽率作為對(duì)照。
2．紙上熒光隨機(jī)選取50粒完整無(wú)損的種子，置燒杯內(nèi)加蒸餾水浸泡10～15分鐘令種子吸脹，然后將種子瀝干，再按0.5cm的距離擺放在濕濾紙上（濾紙上水分不宜過(guò)多，防止熒光物質(zhì)流散），以培養(yǎng)皿覆蓋靜置數(shù)小時(shí)后將濾紙（或連同上面擺放的種子）風(fēng)干（或用電吹風(fēng)吹干）。置紫外光燈下照射，可以看到擺過(guò)死種子的周圍有一圈明亮的熒光團(tuán)，而具有生活力的種子周圍則無(wú)此現(xiàn)象。根據(jù)濾紙上顯現(xiàn)的熒光團(tuán)的數(shù)目就可以測(cè)出喪失生活力的種子的數(shù)量，并由此計(jì)算出有生活力種子所占的百分率。此外，可與此同時(shí)作一平行的常規(guī)種子萌發(fā)試驗(yàn)，計(jì)算其發(fā)芽率作為對(duì)照。
這個(gè)方法應(yīng)用于白菜、蘿卜等十字花科植物種子生命力的鑒定效果好。但不適用衰老、死亡后減弱或失去熒光的種子，因此，對(duì)它們只宜采用直接觀察法。
實(shí)訓(xùn)結(jié)果記錄分析：一般的種子可全部剝皮，取出種仁。發(fā)現(xiàn)的空粒、腐壞粒和病蟲(chóng)害粒記入表格。剝出的種仁先放人盛有清水的器皿中，待一個(gè)重復(fù)全部剝完后再一起放入染液中，使溶液淹沒(méi)種仁，上浮者要壓沉。
抗冷法
1．將種子按普通發(fā)芽試驗(yàn)方法置床，每個(gè)樣品重復(fù)4次。然后在10℃、黑暗條件下處理7天后，移至適宜溫度下，交替光照培養(yǎng)6天，凡正常幼苗作為高活力種子。
2．抗冷測(cè)定主要適用于春播喜溫作物，是在發(fā)芽試驗(yàn)前或發(fā)芽試驗(yàn)期間將種子置于低溫和潮濕的土壤中經(jīng)一定時(shí)間的處理后，移至適宜溫度下生長(zhǎng)，模擬早春田間逆境條件，觀察種子發(fā)芽成苗的能力。
低溫法
1．取試樣200�；�400粒，分4次重復(fù)，用紗布包好，寫好標(biāo)簽，放入冷水中（3~6℃）浸泡一定時(shí)間，然后取出進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)，測(cè)定種子發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)。
2．此法是將種子浸泡在低溫水中，因此，種子會(huì)受到吸脹冷害、吸脹損傷及缺氧的損害，活力低的種子經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的處理后就會(huì)喪失發(fā)芽力，而活力高的種子由于抗逆性強(qiáng)仍能保持其發(fā)芽力。冷浸后所測(cè)得的指標(biāo)能較好地反映種子活力的高低。
電導(dǎo)法
1．取試樣兩份各50粒種子，稱重至小數(shù)兩位，然后放入燒杯內(nèi)，用量筒向各燒杯加入250ml無(wú)離子水，另一燒杯加無(wú)離子水為對(duì)照，于20℃浸泡24h，然后用電導(dǎo)儀測(cè)定浸出液的電導(dǎo)率。
2．高活力種子細(xì)胞膜完整性好，浸入水中后滲出的可溶性物質(zhì)和電解質(zhì)少，浸泡液的電導(dǎo)率低；反之，低活力的種子細(xì)胞膜完整性差，浸泡時(shí)就會(huì)使細(xì)胞內(nèi)的可溶性物質(zhì)外滲，浸泡液的電導(dǎo)率高。
加速衰老法
將200粒種子置于老化盒內(nèi)的支架網(wǎng)上鋪平，箱內(nèi)加水，水面距支架6～8cm，然后加蓋密封，置于規(guī)定溫度（40～50℃）的種子老化箱內(nèi)，經(jīng)48～72h處理。期間，恒溫箱也保持密閉。老化處理結(jié)束后將種子風(fēng)干進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)，將長(zhǎng)成正常幼苗的種子作為高活力種子。
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