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實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)總結(jié)
第一章 總論
概念
[1] 臨床檢驗(yàn)：以離體的血液、體液、排泄物等為標(biāo)本，通過試劑、儀器等進(jìn)行檢測，并對檢測的過
程進(jìn)行全面的質(zhì)量控制，最終得到可靠的檢測結(jié)果或數(shù)據(jù)。
[2] 實(shí)驗(yàn)診斷：通過臨床檢驗(yàn)得到的信息為預(yù)防、診斷、治療和預(yù)后評價(jià)所作的臨床醫(yī)學(xué)活動(dòng)。
[3] 床邊檢驗(yàn)：在病人醫(yī)療現(xiàn)場進(jìn)行的臨床檢驗(yàn)。
[4] 參考值或參考范圍：參考值是指對抽樣的個(gè)體進(jìn)行某項(xiàng)目檢測所得的值；參考范圍是指所有抽樣
組測得值的平均值加減其標(biāo)準(zhǔn)差。
[5] 質(zhì)量控制：為保證臨床檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量(滿足醫(yī)生/客戶要求)而采取的一系列檢查、控制手段
第二章 血液檢查Examination of Blood
一、血液：不斷地流動(dòng)于人體的循環(huán)系統(tǒng)中，直接或間接參與全身各個(gè)組織器官的新陳代謝、功能調(diào)節(jié)及維持人體內(nèi)、外環(huán)境間的平衡，完成各項(xiàng)生理功能活動(dòng)。
二、1. 血液有形成分的組成
血細(xì)胞 占全血40～50%，稱之有形成分
1.白細(xì)胞 中性粒細(xì)胞、 淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、 嗜酸性粒細(xì)胞、 嗜堿性粒細(xì)胞
2.紅細(xì)胞 (主要成分是血紅蛋白)
3.血小板
三．血液一般檢查General Examination of Blood(血常規(guī))
1、一些縮寫
Erythrocyte count (RBC) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
Hemoglobin determination (Hb) 血紅蛋白測定
Leukocyte count (WBC) 白細(xì)胞計(jì)數(shù)
Differential leukocyte count白細(xì)胞分類
Platelet count ( PLT) 血小板計(jì)數(shù)
新生兒特點(diǎn):紅、白細(xì)胞都比成人高，紅細(xì)胞呈―生理性巨幼紅細(xì)胞貧血‖的表現(xiàn)，白細(xì)胞呈感染的表現(xiàn)（粒細(xì)胞增高并左移）
2、紅細(xì)胞計(jì)數(shù) Erythrocyte Count
方法:顯微鏡計(jì)數(shù)法；全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)法
操作:用等滲稀釋液將血液作 200 倍稀釋，滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板中靜止 1-2 min，于高倍鏡下計(jì)數(shù) 5 個(gè)中方格紅細(xì)胞總數(shù)，經(jīng)換算即得每升血液中血紅細(xì)胞數(shù)。
公式:RBC/L= 5個(gè)中方格總數(shù)×5×10′200×106
報(bào)告格式: Δ.ΔΔ×1012/L 3.81×1012 /L
參 考 值
�。校�4.0～5.5×1012/L
�。ㄅ�3.5～5.0×1012/L
�。ㄐ律鷥海�6.0～7.0×1012/L
各種紅細(xì)胞的形態(tài)
3．相關(guān)檢測
[1]．平均紅細(xì)胞容積(MCV):MCV=紅細(xì)胞比容/紅細(xì)胞數(shù)
紅細(xì)胞數(shù)參考值: 80-94fl
[2]． 紅細(xì)胞比容測定（Hct):抗凝全血經(jīng)離心沉淀后，測得下沉的紅細(xì)胞在全血中所占容積的百分比值。 參考值 男性42-49%女性 37-48%
[3]．平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（MCH)： 指平均每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)所含血紅蛋白的量。
[4]．平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC)： 指平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度
參考值: 310-350g/LMCHC=血紅蛋白(g/L)/ 紅細(xì)胞比容(%)×100g/L
[5]．紅細(xì)胞容積分布寬度 (RDW):RDW=S.D./ 平均紅細(xì)胞體積
平均紅細(xì)胞體積參考值:11.5-14.5%
RDW 的統(tǒng)計(jì)學(xué)實(shí)質(zhì)是紅細(xì)胞大小的變異系數(shù) CV RDW<14%
類型 MCV MCHMCHC 臨床類型
大細(xì)胞貧血 >100 >32 310-350 巨幼細(xì)胞貧血
正常細(xì)胞貧血 80-9426-32310-350 AA急性失血性貧血，溶血性貧血，骨髓病性貧血 單純小細(xì)胞貧血<80 <26 310-350 慢性炎癥性貧血腎性貧血
小細(xì)胞低色素貧血<80 <26 <300缺鐵性貧血，鐵粒幼細(xì)胞性貧血，珠蛋白生成障礙性
貧血，慢性失血性貧血
4．臨床意義：
�。� 紅細(xì)胞增加 ）
相對性增高：各種原因?qū)е碌难獫{容量減少，使紅細(xì)胞相對增多。劇烈嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、大面積燒傷、多汗、多尿。
絕對性增高：由于缺氧而致紅細(xì)胞代償性增多，紅細(xì)胞增多的程度與缺氧程度成正比
生理性：胎兒、新生兒、高原地區(qū)居民、劇烈體力勞動(dòng)、情緒激動(dòng)時(shí)，紅細(xì)胞可一過性增多
病理性：嚴(yán)重慢性心、肺疾患，如阻塞性肺氣腫、肺源性心臟病、紫紺型先天性心臟病，真性紅細(xì)胞增多癥
�。� 紅細(xì)胞減少 ）
生理性：妊娠中、后期，血容量增加約 25 %，引起血液稀釋；6個(gè)月～2歲的兒童由于生長發(fā)育迅速,血容量急劇增加而致造血原料相對不足；老年人造血功能明顯減低致紅細(xì)胞減少；月經(jīng)期暫時(shí)引起下降。 病理性：各種類型貧血：如缺鐵性貧血、巨幼紅細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血、繼發(fā)性貧血等。
5．網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及正常參考值：
[1]網(wǎng)織紅細(xì)胞是晚幼紅細(xì)胞脫核后，在完全成熟之前的過渡型紅細(xì)胞。由于胞漿中尚存核糖體、核糖核酸等嗜堿物質(zhì)，用煌焦油蘭等染料進(jìn)行活體染色后，胞漿中可見藍(lán)綠或藍(lán)色的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故名網(wǎng)織紅細(xì)胞。 成人：0.5%-1.5%新生兒（<3月）：2%-6%
[2]網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的意義
增多：骨髓增生旺盛。常見于溶血性貧血，尤其是急性溶血性貧血（可達(dá)20%以上）、急性大失血。貧血治療有效。如缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血，經(jīng)相應(yīng)治療后1-2日即開始，1周左右達(dá)最高峰
減少：骨髓增生低下，如再生障礙性貧血、溶血性貧血有再生障礙危象時(shí)
6．白細(xì)胞測定
[1]白細(xì)胞計(jì)數(shù)Leukocyte Count
方法：顯微鏡計(jì)數(shù)法 、全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀法計(jì)數(shù)法:以 2% 冰醋酸對血液作定量稀釋，同時(shí)破壞紅細(xì)胞。然后將懸液充入細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)，低倍鏡計(jì)數(shù) 4 個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)。計(jì)算原則同紅細(xì)胞。 MCH=血紅蛋白(g/l)/ 紅細(xì)胞百萬數(shù)/μl 參考值: 26-32pg
原理（顯微鏡計(jì)數(shù)原理）：用 2 % 乙酸對血液作定量稀釋，同時(shí)破壞紅細(xì)胞�；靹虿⒌稳胗�(jì)數(shù)室中，低倍顯微鏡下計(jì)數(shù) 4 大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算得每升血液中白細(xì)胞總數(shù)。
公式：WBC/L = 4 格白細(xì)胞總數(shù) 4×10×20×106
報(bào)告格式:Δ.ΔΔ×109/L
參考值:成人4.0～10.0 × 109/L;新生兒15.0～20.0 × 109/L
臨床意義
�。ò准�(xì)胞增高）
生理性增高:見于妊娠期、分娩時(shí)、新生兒;劇烈運(yùn)動(dòng)、淋浴;嚴(yán)寒、高溫;午后高于清晨;飲食后高于飲食前等; 病理性增高:急性感染如肺炎、扁桃體炎、急性闌尾炎。嚴(yán)重組織損傷、大量細(xì)胞破壞。如術(shù)后12～76h，WBC常 >10.0×109/L；急性心肌梗死后1～2d，常見WBC明顯增高；急性溶血亦見WBC增多，增多成分以中性分葉核粒細(xì)胞為主。急性大出血:如脾臟破裂或?qū)m外孕輸卵管破裂后，WBC迅速增多常達(dá)20.0×109/L。這可能是應(yīng)激狀態(tài)、或內(nèi)出血一過性缺氧。急性中毒:如安眠藥、滴滴畏中毒， WBC可高達(dá)20×109/L以上，代謝性酸中毒。如糖尿病、酮體癥、酸中毒及慢性腎炎尿毒癥時(shí)，也常見WBC增多，均以中性粒細(xì)胞為主。
白血病及惡性腫瘤:急、慢性白血病、肝癌、胃癌等腫瘤細(xì)胞可產(chǎn)生促粒細(xì)胞生成素，并能吸引骨髓儲備池WBC釋放。
�。ò准�(xì)胞減少）
某些革蘭氏陰性桿菌感染如傷寒、副傷寒桿菌感染時(shí)，白細(xì)胞總數(shù)可低至2.0×109/L；病毒感染。某些血液病如再生障礙性貧血；巨幼紅細(xì)胞性貧血；惡性網(wǎng)狀細(xì)胞病 （惡組）；急性非白血性白血病。脾功能亢進(jìn)破壞過多、脾素抑制骨髓生成;慢性理化損傷;電離輻射，如X線、放射性核素等；服氯霉素。自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡。
[2]白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)與臨床意義
中性粒細(xì)胞（neutrophil）：游走、吞噬 50 ～ 70%
嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophil）：致敏反應(yīng)0.5 ～ 5%
嗜堿性粒細(xì)胞（basophil）：釋放組織胺、肝素0 ～ 1%單核細(xì)胞（monocyte）：吞噬、清除死亡細(xì)胞及異物3～ 8%
淋巴細(xì)胞（lymphocyte）：參與體液、細(xì)胞免疫20 ～ 40%
中性粒細(xì)胞Neutrophil
生理特性：滲出性、變形性、趨化性、吞噬性
骨髓血液
分裂池 成熟池 儲備池邊緣池循環(huán)池
4-5d1-3d 2-3d
核左移：原粒早幼粒中幼粒/晚幼粒桿狀核/桿狀核分葉核/分葉核細(xì)胞核左移：周圍血中桿狀核粒細(xì)胞增多甚至出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細(xì)胞時(shí)均稱為核左移
桿狀核粒細(xì)胞增多：6%：輕度左移；10%：中度左移；25%：重度左移或稱為類白血病反應(yīng)
類白血病反應(yīng) ：患兒男， 2.5歲，日本籍，于10天前因受冷而發(fā)熱，自測體溫38℃（腋下），無畏寒、頭痛、嘔吐、腹瀉，就診于當(dāng)?shù)蒯t(yī)院，血常規(guī) WBC 28.9×109/L，阿莫西林0.125g 3/日治療，無明顯好轉(zhuǎn)，4天后患兒面、背及雙上肢皮膚反復(fù)出現(xiàn)散在紅色丘疹，停藥否無區(qū)別。1999年7月5日急診住我院。實(shí)驗(yàn)室檢查，血象：Hb110g/L, WBC 23×109/L,血小板 121×109/L，幼稚型異常淋巴 56%，成熟淋巴 21%，嗜酸性粒細(xì)胞2%，中性粒細(xì)胞 21%，骨髓穿刺二次，骨髓細(xì)胞分類象同血涂片象。
細(xì)胞核右移：正常人周圍血中性粒細(xì)胞以三葉核者為主，若五葉者超過5% 時(shí)為核右移，此時(shí)常伴有白細(xì)胞總數(shù)減少。一過性地出現(xiàn)核右移是正�，F(xiàn)象。如在疾病進(jìn)行期突然出現(xiàn)核右移的變化，則表示預(yù)后不良 中性粒細(xì)胞臨床意義生理性增高:見于妊娠期、分娩時(shí)、新生兒期;劇烈運(yùn)動(dòng)、熱水浴;嚴(yán)寒、高溫;午后高于清晨;飲食后高于飲食前等
病理性增高:急性感染;嚴(yán)重組織損傷;急性大出血;急性中毒;白血病及惡性腫瘤
病例：患者朱全妹，女性，47歲，因磚墻砸傷腰骶臀部致左下肢活動(dòng)受限伴腰骶臀部皮膚發(fā)紫5天于2001—12—04由急診收治入院。
1．創(chuàng)傷性失血性休克 2．腰骶部、髂后部、右臀后部皮膚嚴(yán)重挫擦傷伴皮下積血 3．骨盆嚴(yán)重骨折 4．會陰部、肛門嚴(yán)重挫裂傷
血常規(guī)檢查結(jié)果：Hb：92g/L RBC：3.0×1012/LPLT：271×109/L
WBC：32.7×109/L：中幼粒細(xì)胞： 2% ;晚幼粒細(xì)胞：5%
桿狀核粒細(xì)胞：35% ;多核粒細(xì)胞：45% ;淋巴細(xì)胞：9% 單核細(xì)胞： 4%
中性粒細(xì)胞減少:某些革蘭氏陰性桿菌感染;某些血液病;脾功能亢進(jìn);慢性理化損傷;自身免疫性疾病
淋巴細(xì)胞Lymphocyte
病理性增多見于：病毒性感染;某些慢性感染;各類淋巴細(xì)胞性白血病
淋巴細(xì)胞減少見于:接觸放射線;應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素及腎移植術(shù)后、AIDS
單核細(xì)胞Monocyte
單核細(xì)胞病理性增多見于：心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病;急性感染的恢復(fù)期;活動(dòng)性肺結(jié)核及粟粒性結(jié)核;慢性單核細(xì)胞白血病
嗜酸性粒細(xì)胞Eosinophil
增高見于：過敏性疾病;寄生蟲病;皮膚病;慢性嗜酸性白血病及淋巴瘤
7．血小板計(jì)數(shù)platelet
是由骨髓中成熟巨核細(xì)胞生成;在止血過程中起著重要的作用
計(jì)數(shù)方法:顯微鏡計(jì)數(shù)法;全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀法
參考值100～300×109/L
臨床意義
血小板增多 > 400×109/L;見于血小板增多癥、慢性粒細(xì)胞增多癥、真性紅細(xì)胞增多癥、骨髓纖維化、脾切除等。
血小板減少 < 100×109/L;見于血小板減少紫癜(ITP)、再生障礙性貧血、急性白血病、X射線照射。 病例 患者：女32歲 已婚 ，有一8歲女兒，無業(yè)
主述：經(jīng)常頭痛、疲乏、失眠。右肋骨下疼痛,胸骨疼痛�；颊唛L期服用減肥藥，無間斷
血液檢驗(yàn)結(jié)果：
WBC：15.4×109/L RBC：5.53×1012/L
NC: 85.2% Hb: 150g/L
LC: 11.6% PLT： 1321 ×109/L
MO: 1.8% RDW: 17.8 %
EOS: 0.9% BAS: 0.5%
8．血紅蛋白測定
方法：氰化高鐵血紅蛋白法全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀
原理：除Hbs外，多種血紅蛋白（Hb）均可被高鐵氫化鉀氧化成高鐵血紅蛋白（Hi），再與CN- 結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色氧化高鐵血紅蛋白（HiCN），在540nm處有一吸收峰
9、全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀
多項(xiàng)參數(shù)測定
儀器組成:1.主機(jī) 2 終端機(jī) 3 打印機(jī)
閱讀報(bào)告:1.18、23 項(xiàng)參數(shù)中英文報(bào)告2.圖解3. 警告標(biāo)志4. 含義報(bào)告
庫爾特原理：孔徑阻抗細(xì)胞計(jì)數(shù)原理
白細(xì)胞自動(dòng)化分類
二項(xiàng)式分類 粒細(xì)胞和非粒細(xì)胞
三項(xiàng)式分類 淋巴、中性粒細(xì)胞和中間細(xì)胞
五項(xiàng)式分類 嗜中、嗜堿、嗜酸、淋巴、單核細(xì)胞
第三章 貧血
一、貧血總論
1．貧血Anemia：
是一種癥狀，是指人體單位體積循環(huán)血中，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白含量和紅細(xì)胞比積低于正常參考值——即稱為貧血
2．RBC:主要功能：攜帶O2、運(yùn)輸CO2
膜組成：膜糖、膜脂、膜蛋白
膜結(jié)構(gòu)：不對稱性、流動(dòng)性、骨架
膜功能：物質(zhì)運(yùn)輸、抗原性、變形性、免疫功能
Hb:是紅細(xì)胞中的運(yùn)輸?shù)鞍�，主要功能是吸收肺部大量CO2并輸送到身體各組織
Hct:是指抗凝全血經(jīng)離心沉淀后，測得下沉的紅細(xì)胞在全血中所占容積的百分比值
3．貧血各系統(tǒng)的表現(xiàn)：
全身軟弱無力、疲乏困倦、皮膚粘膜蒼白
呼吸及循環(huán)系統(tǒng)： 心悸、氣短、心率加快、呼吸加重等，嚴(yán)重者發(fā)生心力衰竭
消化系統(tǒng)：食欲不振、腹脹、惡心、嘔吐、消 化不良、腹瀉或便秘等
泌尿生殖系統(tǒng)： 尿可出現(xiàn)少量蛋白，腎功能輕度減低，甚至發(fā)生尿少、尿閉和急性腎功能衰竭 神經(jīng)系統(tǒng)： 頭痛、頭暈、畏寒、反應(yīng)遲鈍、耳鳴、眼花
4．貧血的病因與發(fā)病機(jī)制分類
紅細(xì)胞生成減少：骨髓造血功能障礙、紅細(xì)胞生成素產(chǎn)生缺陷、造血物質(zhì)缺乏或失利用
紅細(xì)胞破壞增多：
紅細(xì)胞內(nèi)在異常：膜缺陷、酶缺陷、珠蛋白鏈生成異常、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿
紅細(xì)胞外在異常：免疫性、機(jī)械性、化學(xué)與物理、感染、單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)功能亢進(jìn)
紅細(xì)胞丟失過多：急性、慢性失血
貧 血 分 類
貧血發(fā)病病因分類
缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血
溶血性貧血、血紅蛋白病
紅細(xì)胞膜缺陷致溶貧
自身免疫性溶貧
陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白病
紅細(xì)胞形態(tài)分類
類 型 MCV（f l）MCH (pg)
大細(xì)胞型＞100 ＞32
正 常80 ~ 94 26 ~ 32
單純小細(xì)胞 ＜80 ＜26
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