檢驗技師考點：酶活性測定

　　20世紀(jì)50年代以前大都使用固定時間法。這種方法是以酶催化反應(yīng)的平均速度來計算酶的活性，現(xiàn)多已不用。50年代中期開始采用連續(xù)監(jiān)測法。這種方法用自動生化分析儀上完成，可以測酶反應(yīng)的初速度，其結(jié)果遠(yuǎn)比固定時間法準(zhǔn)確，在高濃度標(biāo)本尤為明顯，但本法也受到反應(yīng)時間，反應(yīng)溫度，試劑等的影響，應(yīng)加以注意。

　　1)定時法：

　　通過測定酶反應(yīng)開始后某一時間段內(nèi)(t1到t2)產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來求取酶反應(yīng)初速度的方法，稱為兩點法，其中t1往往取反應(yīng)開始的時間。在酶反應(yīng)一定時間后，往往通過加入強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、蛋白沉淀劑等，使反應(yīng)完全停止，所以也叫中止反應(yīng)法。

　　2)連續(xù)監(jiān)測法：

　　又稱為動力學(xué)法或速率法、連續(xù)反應(yīng)法。在酶反應(yīng)過程中，用儀器監(jiān)測某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物濃度隨時間的變化所發(fā)生的改變，通過計算求出酶反應(yīng)初速度。

　　3)平衡法：

　　通過測定酶反應(yīng)開始至反應(yīng)達(dá)到平衡時產(chǎn)物或底物濃度總變化量來求出酶活力的方法，又叫終點法。

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