2017年衛(wèi)生資格檢驗(yàn)技師精華考點(diǎn)
2017年衛(wèi)生資格考試即將來(lái)臨，相信大家都有相信通過(guò)考試的。接下來(lái)應(yīng)屆畢業(yè)生小編為大家搜索整理了2017年衛(wèi)生資格檢驗(yàn)技師精華考點(diǎn)，預(yù)祝大家考試順利。
尿液化學(xué)成分檢查項(xiàng)目之一
尿液蛋白為尿液化學(xué)成分檢查中最重要的項(xiàng)目之一。正常人的腎小球?yàn)V液中存在小分子量的蛋質(zhì)，在雙月刊牢牢曲小管時(shí)絕大部分又被重吸收，因此終尿中的蛋白質(zhì)含量很少，僅為30-130mg/24h.隨機(jī)一次尿中蛋白質(zhì)為0.80mg/L.尿蛋折定性試驗(yàn)呈陰性反應(yīng)。
當(dāng)尿液中蛋白質(zhì)超過(guò)正常范圍時(shí)稱為蛋白尿，含量大于0.1g/L時(shí)定試驗(yàn)可陽(yáng)性。正常時(shí)分子量在7萬(wàn)以上的蛋白質(zhì)不能通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)膜，而分子量1-3萬(wàn)的低分子蛋白質(zhì)雖大多可通過(guò)濾過(guò)膜，但又為近曲小管重吸收，由于腎小管細(xì)胞分泌的蛋白如TammHorsfall蛋白(T-H蛋白)、SigA等以及下尿路分泌的粘液蛋白可進(jìn)入尿中。
尿蛋白質(zhì) 2/3來(lái)自血漿蛋白，其中白蛋白約占40%其余為小分子量的酶(溶菌酶等、)肽類(lèi)、激素類(lèi)先進(jìn)，如將正常人尿液濃縮后再經(jīng)免疫電泳，可按蛋白質(zhì)的分子量量大小分成以下3組：
�、俑叻肿恿康鞍踪|(zhì)：分子量大于9萬(wàn)，含量極微，包括由腎髓袢升支極及遠(yuǎn)曲小管上皮細(xì)胞分泌的T-H糖蛋白及分泌型IGA等;
②中分子量蛋白質(zhì)：分子量4-9萬(wàn)，是以白蛋白為主的血漿蛋白，可占尿蛋月總數(shù)的1/2-2/3;③低分子量蛋白質(zhì)：分子量小于4萬(wàn)，絕大多數(shù)已在腎小管重吸收。因此尿中含量極少，如免疫球蛋白FC片段，游離輕鏈、α1微球蛋白、β2微球蛋白等。
熒光色素
許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現(xiàn)象，但并非都可用作熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機(jī)化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有：
1.異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC)為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末，易溶于水或酒精等溶劑。分子量為 389.4，最大吸收光波長(zhǎng)為490——495nm，最大發(fā)射光波長(zhǎng)520——530nm，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光，結(jié)構(gòu)式如下：有兩種同分異結(jié)構(gòu)，其中異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性、與蛋白質(zhì)結(jié)合能力等方面都更好，在冷暗干燥處可保存多年，是應(yīng)用最廣泛的熒光素。其主要優(yōu)點(diǎn)是：①人眼對(duì)黃綠色較為敏感，②通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。
2.四乙基羅丹明(rhodamine，RIB200)為橘紅色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性質(zhì)穩(wěn)定，可長(zhǎng)期保存。結(jié)構(gòu)式如下：最大吸收光波長(zhǎng)為570nm，最大發(fā)射光波長(zhǎng)為595～600nm，呈橘紅色熒光。
3.四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate，TRITC)結(jié)構(gòu)式如下：最大吸引光波長(zhǎng)為 550nm，最大發(fā)射光波長(zhǎng)為620nm，呈橙紅色熒光。與FITC的翠綠色熒光對(duì)比鮮明，可配合用于雙重標(biāo)記或?qū)Ρ热旧�。其異硫氰基可與蛋白質(zhì)結(jié)合，但熒光效率較低。
免疫熒光原理
免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性，所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí)，只要知道其中的一個(gè)因素，就可以查出另一個(gè)因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體(或抗原)上，與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。
直接法：將標(biāo)記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體，室溫下干燥后封片、鏡檢。
間接法：如檢查未知抗原，先用已知未標(biāo)記的特異抗體(第一抗體)與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)，用水洗去未反應(yīng)的抗體，再用標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)與抗原標(biāo)本反應(yīng)，使之形成抗原—抗體—抗體復(fù)合物，再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記抗體，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體，則表明抗原標(biāo)本是已知的，待檢血清為第一抗體，其它步驟的抗原檢查相同。
標(biāo)記的抗抗體是抗球蛋白抗體，同于血清球蛋白有種的特異性，如免疫抗雞血清球蛋白只對(duì)雞的球蛋白發(fā)生反應(yīng)，因此，制備標(biāo)記抗體適用于雞任何抗原的診斷。
免疫熒光技術(shù)特點(diǎn)
該技術(shù)的主要特點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快。主要缺點(diǎn)是：非特異性染色問(wèn)題尚未完全解決，結(jié)果判定的客觀性不足，技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。
熒光免疫法按反應(yīng)體系及定量方法不同，還可進(jìn)一步分做若干種。與放射免疫法相比，熒光免疫法無(wú)放射性污染，并且大多操作簡(jiǎn)便，便于推廣。國(guó)外生產(chǎn)的TDM用試劑盒，有相當(dāng)一部分即屬于此類(lèi)，并且還有專(zhuān)供TDM熒光偏振免疫分析用的自動(dòng)分析儀生產(chǎn)。
由于一般熒光測(cè)定中的本底較高等問(wèn)題，熒光免疫技術(shù)用于定量測(cè)定有一定困難。新發(fā)展了幾種特殊的熒光免疫測(cè)定，與酶免疫測(cè)定和放射免疫分析一樣，在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用。
抗原抗體反應(yīng)
將抗原(標(biāo)準(zhǔn)品和受檢標(biāo)本)、標(biāo)記抗原和抗血清按順序定量加入小試管中，在一定的溫度下進(jìn)行反應(yīng)一定時(shí)間，使競(jìng)爭(zhēng)抑制反應(yīng)達(dá)到平衡。不同質(zhì)量的抗體和不同含量的抗原對(duì)溫育的溫度和時(shí)間有不同的要求。
如受檢標(biāo)本抗原含量較高，抗血清的親和常數(shù)較大，可選擇較高的溫度(15～37℃)進(jìn)行較短時(shí)間的溫育，反之應(yīng)在低溫(4℃)作較長(zhǎng)時(shí)間的溫育，形成的抗原抗體復(fù)合物較為牢固。
抗血清的檢定
含有特異性抗體的抗血清是放射免疫分析的主要試劑，常以抗原免疫小動(dòng)物誘發(fā)產(chǎn)生多克隆抗體而得�？寡宓馁|(zhì)量直接影響分析的靈敏度和特異性�？寡遒|(zhì)量的指標(biāo)主要有親和常數(shù)、交叉反應(yīng)率和滴度。
1.親和常數(shù)親和常數(shù)(affinityconstant)常用K值表示。它反映抗體與相應(yīng)抗原的結(jié)合能力。K值的單位為mol/L，即表示 1mol抗體稀釋至若干L溶液中時(shí)，與相應(yīng)的抗原結(jié)合率達(dá)到50%.抗血清K值越大，放射免疫分析的靈敏度、精密和準(zhǔn)確度越佳�？寡宓腒值達(dá)到 109～1012mol/L才適合用于放射免疫分析。
2.交叉反應(yīng)率放射免疫分析測(cè)定的物質(zhì)有些具有極為類(lèi)似的結(jié)構(gòu)，例如甲狀腺素的T3、T4，雌激素中的雌二醇、雌三醇等。針對(duì)一種抗原的抗血清往往對(duì)于其類(lèi)似物會(huì)發(fā)生交叉反應(yīng)。
因此交叉反應(yīng)率反映抗血清的特異性，交叉反應(yīng)率過(guò)大將影響分析方法的準(zhǔn)確性。交叉反應(yīng)率的測(cè)定方法為用與抗血清相應(yīng)抗原及其類(lèi)似物用同法進(jìn)行測(cè)定，觀察置換零標(biāo)準(zhǔn)管50%時(shí)的量。以T3抗血清為例，置換零標(biāo)準(zhǔn)50%T3為1ng，其類(lèi)似物T4則需 200ng，則其交叉反應(yīng)率為：1/200=0.5%.
3.滴度滴度系指將血清稀釋時(shí)能與抗原發(fā)生反應(yīng)的最高稀釋度。它反映抗血清中有效抗體的濃度。在放射免疫分析中滴度為在無(wú)受檢抗原存在時(shí)，結(jié)合50%標(biāo)記抗原時(shí)抗血清的稀釋度。
胃粘液|碳酸氫鹽
1.粘液(mucus)胃粘膜以常處于與胃液接觸中，而只有食物被消化，胃組織不受損傷，其部分原因是因?yàn)楦采w于全胃表面的一層膠狀粘液的保護(hù)作用。這種膠狀物形成一種粘液屏障與胃粘膜屏障不同，保護(hù)胃沾膜免受酸、胃蛋白酶及其它的害物質(zhì)侵蝕。這還人滑潤(rùn)作用，使胃粘膜不受機(jī)械性損傷。粘液不能阻擋水和電解質(zhì)的通透。在基礎(chǔ)狀況下對(duì)胃酸有一定的中和作用，但在刺激后胃酸分泌時(shí)，此時(shí)作用微不足道。
2.碳酸氫鹽：是覆蓋于胃表面的粘液一碳酸氫鹽屏障，對(duì)粘膜起保護(hù)作用，這個(gè)屏障作為含有PH梯度的膠狀物為上皮表面提供了一處中性微環(huán)境。碳酸氫鹽由胃表面粘液細(xì)胞所分泌。
胃液中鹽酸
胃液中鹽酸以解離的游離酸與結(jié)合的結(jié)合酸兩種形式在，兩者加在一起為交響曲鹽酯。此外胃液中還有極少的可以忽略不計(jì)的其它酸性物質(zhì)，如有機(jī)酸乳酸、乙酸等及酸性鹽酸性磷酸鹽。這些酸總和起來(lái)以總酸度表示，但目前多以總鹽酸分泌量表示胃液酸排出量。
鹽酸的主要消化功能是胃蛋白酶原的激活提供所必須的高度酸化條件，同時(shí)也能有限地水解少許多肽和多糖。胃酸還殺死食入細(xì)菌的能力，此錢(qián)鹽酸進(jìn)入小腸后可以促進(jìn)胰液、腸液和膽汁的的分泌促進(jìn)對(duì)鈣和鐵等物質(zhì)的吸收。胃液過(guò)多或過(guò)少均可出現(xiàn)許多癥狀，或成為疾病的原因之一。測(cè)定胃鹽酸分泌量是常用的測(cè)量胃分泌功能的試驗(yàn)。
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