酶活性中心的特點(diǎn)及鑒定方法
酶分子中能夠直接與底物分子結(jié)合，并催化底物化學(xué)反應(yīng)的部位，這一部位就成為酶的活性中心。下面是百分網(wǎng)小編給大家整理的酶活性中心的特點(diǎn)，希望能幫到大家!
酶活性中心的特點(diǎn)
一般認(rèn)為活性中心主要由兩個(gè)功能部位組成：第一個(gè)是結(jié)合部位，酶的底物靠此部位結(jié)合到酶分子上；第二個(gè)是催化部位，底物的鍵在此被打斷或形成新的鍵從而發(fā)生一定的化學(xué)變化。
組成功能部位的是酶分子中在三維結(jié)構(gòu)上比較靠近的.少數(shù)幾個(gè)氨基酸殘基或是這些殘基上的某些基團(tuán)，它們?cè)谝患?jí)結(jié)構(gòu)上可能相距甚遠(yuǎn)，甚至位于不同肽鏈上，而是通過(guò)肽鏈的盤(pán)繞、折疊在空間構(gòu)象上相互靠近；對(duì)于需要輔酶的酶來(lái)說(shuō)，輔酶分子或輔酶分子的某一部分結(jié)構(gòu)也是功能部位的組成部分。
活性中心必需的基團(tuán)有：組氨酸的咪唑基、谷氨酸天冬氨酸的側(cè)鏈羧基和絲氨酸的羥基。
酶活性中心的鑒定方法
1)化學(xué)修飾法
觀察酶分子被一定的化學(xué)試劑修飾前后酶活性的變化情況，結(jié)合其它方法，推斷該基團(tuán)是否為活性中心的功能基團(tuán)。如胰凝蛋白酶與二異丙基氟磷酸(DIFP)作用即會(huì)失去活性。DIFP能與酶分子中的Ser殘基共價(jià)結(jié)合，胰凝乳蛋白酶中有28個(gè)Ser殘基，而與DIFP作用的僅僅是其中的Ser195。這表明Ser 195是胰凝乳蛋白酶活性中心的組成部分。
2)親和標(biāo)記法
是使用一個(gè)能與酶的活性中心特異結(jié)合的正常底物類似物作為活性部位基團(tuán)的標(biāo)記試劑。該類似物不能為酶所催化而發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，卻能與酶的特定基團(tuán)發(fā)生共價(jià)結(jié)合使酶失活。如N-對(duì)-甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲基酮(TPCK)是胰凝乳蛋白酶的親和標(biāo)記物，當(dāng)用C14 標(biāo)記的TPCK與胰凝乳蛋白酶一起保溫時(shí)，酶即失活。結(jié)構(gòu)分析證明TPCK 與酶分子中的His57發(fā)生作用。說(shuō)明His57是活性中心的另一組成部分。
3)X-射線衍射分析法
可直接觀察酶與底物的結(jié)合情況。
關(guān)于酶活性中心
一般情況下，多相催化劑只有局部位置才產(chǎn)生活性，稱作活性中心，現(xiàn)多稱為活性部位�；钚灾行目梢允窃�、原子團(tuán)、離子、表面缺陷等，形式多種多樣。在反應(yīng)中活性中心的數(shù)目和結(jié)構(gòu)往往發(fā)生變化。
活性中心于1925年由泰勒(Tayler)提出，他假設(shè)那些位于晶體頂點(diǎn)，晶棱或結(jié)構(gòu)缺陷處的原子，由于其本身化合價(jià)的不飽和性，亦即存在著表面自由價(jià)，因而具有很高活性，能夠化學(xué)吸附分子，使其活化，進(jìn)而發(fā)生反應(yīng)。
基本內(nèi)容
定義
指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。
單位
在最適條件下，1分鐘轉(zhuǎn)化1微摩爾底物所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
比活力
每毫克酶蛋白所具有的酶活力。單位是u/mg。比活力越高則酶越純。
轉(zhuǎn)化數(shù)
每分子酶或每個(gè)酶活性中心在單位時(shí)間內(nèi)能催化的底物分子數(shù)(TN)。相當(dāng)于酶反應(yīng)的速度常數(shù)kp。也稱為催化常數(shù)（Kcat）。1/kp稱為催化周期。碳酸酐酶是已知轉(zhuǎn)換數(shù)最高的酶之一，高達(dá)36×106每分，催化周期為1.7微秒。
測(cè)定
一般采用測(cè)定酶促反應(yīng)初速度的方法來(lái)測(cè)定活力，因?yàn)榇藭r(shí)干擾因素較少，速度保持恒定。反應(yīng)速度的單位是濃度/單位時(shí)間，可用底物減少或產(chǎn)物增加的量來(lái)表示。因?yàn)楫a(chǎn)物濃度從無(wú)到有，變化較大，而底物往往過(guò)量，其變化不易測(cè)準(zhǔn)，所以多用產(chǎn)物來(lái)測(cè)定。
【酶活性中心的特點(diǎn)及鑒定方法】相關(guān)文章：
唐朝佛像的特點(diǎn)及鑒定方法11-29
蔬菜害蟲(chóng)的特點(diǎn)是什么及治理方法01-03
2017普通話聲調(diào)的特點(diǎn)及練習(xí)方法08-18
雅思聽(tīng)力的幾個(gè)顯著特點(diǎn)及備考方法09-10
總結(jié)注會(huì)考試科目特點(diǎn)及備考方法10-16
2017年普通話聲調(diào)的特點(diǎn)及練習(xí)方法08-16
高三各學(xué)科特點(diǎn)及學(xué)習(xí)方法08-13